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非极性色谱柱的使用注意事项

  非极性色谱柱的固定相通常由100二甲基聚硅氧烷(PDMS)等非极性材料构成。其分离机制基于化合物与固定相之间的范德华力差异,尤其是色散力。由于非极性分子间的作用力较弱,样品组分在固定相和流动相之间的分配行为主要取决于其沸点和分子量。例如,高沸点的化合物在固定相中停留时间更长,后流出色谱柱;而低沸点或小分子量的化合物则移动速度较快,先被洗脱。
 
  相似相溶原则的应用:根据“相似相溶”原理,非极性色谱柱对非极性或弱极性化合物具有更高的亲和力。这类化合物在非极性固定相中溶解度较高,分配系数较大,因此在柱内保留时间较长;而极性较强的物质因与固定相作用力弱,更容易被流动相洗脱。这种特性使得非极性色谱柱特别适用于烃类(如烷烃、芳烃)、卤代烃等非极性物质的分离。
 
  沸点优先的分离顺序:在非极性色谱柱中,组分的分离顺序主要由沸点决定,而非极性强弱。
 
  非极性色谱柱的使用注意事项:
 
  1.避免机械振动和冲击:在使用和存放过程中,要防止色谱柱受到强烈的机械振动或碰撞,以免导致柱床塌陷或填料分布不均匀,影响分离效果。
 
  2.控制温度和压力变化:应避免温度和压力的急剧变化,因为突然的温度变化或压力波动可能会使柱内的填充状况发生改变,进而影响柱效。在调节流速或进行阀进样时,操作要缓慢进行。
 
  3.合理选择流动相:根据样品的性质和非极性色谱柱的特点,选择合适的流动相。一般来说,适用于以非极性或弱极性溶剂为流动相的情况。同时,要注意流动相的pH值范围,避免超出色谱柱的耐受范围,导致固定相被破坏。
 
  4.防止杂质污染:尽量使用纯净的样品和流动相,并在进样前对样品进行过滤,以防止颗粒物或其他杂质进入色谱柱,堵塞柱子或影响分离效果。此外,还可以在进样器前连接预柱或保护柱,以延长色谱柱的使用寿命。
 
  5.正确冲洗和维护:定期用强溶剂冲洗色谱柱,以清除残留在柱内的杂质和污染物。在进行清洗时,应采用与流动相互溶的溶剂逐渐过渡的方式进行置换,每种流动相的体积一般应是柱体积的20倍左右。实验结束后,要及时用适当的溶剂冲洗色谱柱,并将其保存在合适的溶剂中,如乙腈或甲醇,拧紧柱接头,防止溶剂挥发干燥。
非极性色谱柱