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弱极性色谱柱的柱效下降会发生什么?

  弱极性色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标,混合物能否在色谱柱中得到分离,除取决于选择合适的固定相外,还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。
  在一定的色谱操作条件下,色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。一般说来塔板数愈多,或塔板高度愈小,色谱柱的分离效能愈好。
  弱极性色谱柱的柱效值并不足以预测在所有条件下的柱性能。对大多数色谱工作者来说,柱性能指的是色谱柱用于特定分离的能力,而仅仅有高柱效并不能保证这种分离能力。不管用什么特定的测试方法,都会有几个参数影响柱效的测定。而测量和计算方法对柱效值的确定起着极大的作用。这些参数包括:洗脱液的成分和粘度及其线流速,测定塔板数所用的溶质、温度、柱长、填料装填方式、颗粒度,还有所选用的测量和计算方法。
  一般柱效不好,先排除其他问题,都没有问题的话就是柱子不行了。如果柱子比较老,可以反过来小流速冲洗一下(仅适用旧柱子,有风险)。把柱头变色的填料挖掉,用同类新的填料填充好,效果很好。正向冲洗色谱柱、反向冲洗色谱柱、超声清洗色谱柱筛板、如果是柱内死体积增加则需更换新柱。
  色谱柱是消耗品,理论来说,柱效很低的色谱柱是基本没用的,但是有一招,就是反冲色谱柱,但要注意流速不要设置太大,这样的话还能再坚持一会。如果柱子真的很老旧了,就反相冲洗试试,可能还能用一段时间,但不会太久。在然后就只能换填料了,或换新的柱子。
  对于提高弱极性色谱柱柱效的方法可以参考:
  1.降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
  2.减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
  3.减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
  4.选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
  5.适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。
  6.尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
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